除了實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀,還有哪些儀器可以檢測(cè)肉類微生物?

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除了實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 儀外,還有多種儀器可用于檢測(cè)肉類微生物,以下是一些常見的儀器及其檢測(cè)原理和適用范圍:
酶標(biāo)儀:
檢測(cè)原理:基于酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)技術(shù)。將已知的微生物抗原或抗體固定在微孔板表面,加入待檢樣品,若樣品中含有相應(yīng)的微生物或其抗原、抗體,就會(huì)與固定在板上的物質(zhì)發(fā)生特異性結(jié)合。然后加入酶標(biāo)記的抗體或抗原,形成抗原 - 抗體 - 酶標(biāo)物復(fù)合物。*后加入酶的底物,酶催化底物顯色,通過(guò)酶標(biāo)儀測(cè)定吸光度值,吸光度與樣品中微生物的含量呈正相關(guān),從而判斷微生物的存在和含量。
適用范圍:可檢測(cè)肉類中的多種微生物及其代謝產(chǎn)物,如檢測(cè)肉類中的金黃色葡萄球菌腸毒素、肉毒桿菌毒素等微生物毒素,以及一些致病菌的抗體等。
微生物快速檢測(cè)儀:
檢測(cè)原理:常見的有基于生物傳感器技術(shù),如免疫傳感器、微生物細(xì)胞傳感器等。免疫傳感器是利用抗原抗體特異性結(jié)合的原理,將抗體固定在傳感器表面,當(dāng)樣品中的微生物抗原與之結(jié)合后,通過(guò)檢測(cè)傳感器的電信號(hào)、光信號(hào)等變化來(lái)判斷微生物的存在和含量;微生物細(xì)胞傳感器則是利用微生物細(xì)胞的生理特性,如呼吸作用、代謝產(chǎn)物等與傳感器相互作用產(chǎn)生信號(hào)變化來(lái)進(jìn)行檢測(cè)。
適用范圍:可快速檢測(cè)肉類中的常見致病菌,如沙門氏菌、大腸桿菌、李斯特菌等,還能檢測(cè)肉類的細(xì)菌總數(shù)等指標(biāo),具有檢測(cè)速度快、操作簡(jiǎn)便的特點(diǎn)。
流式細(xì)胞儀:
檢測(cè)原理:將肉類樣品經(jīng)過(guò)處理制成單細(xì)胞懸液,加入熒光標(biāo)記的抗體或核酸染料。熒光標(biāo)記的抗體能特異性地與微生物表面的抗原結(jié)合,核酸染料可與微生物的核酸結(jié)合。當(dāng)細(xì)胞懸液通過(guò)流式細(xì)胞儀的流動(dòng)室時(shí),在激光束的照射下,細(xì)胞產(chǎn)生散射光和熒光信號(hào),儀器根據(jù)這些信號(hào)的強(qiáng)度和特征對(duì)細(xì)胞進(jìn)行分析和分類,從而區(qū)分出不同的微生物群體,并計(jì)算出微生物的數(shù)量。
適用范圍:可用于檢測(cè)肉類中的多種微生物,能夠快速準(zhǔn)確地對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)和分類,尤其適用于對(duì)微生物群體的多樣性分析。
氣質(zhì)聯(lián)用儀(GC-MS):
檢測(cè)原理:微生物在生長(zhǎng)代謝過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生一些揮發(fā)性的代謝產(chǎn)物,如脂肪酸、醇類、醛類等。將肉類樣品中的揮發(fā)性成分提取出來(lái),通過(guò)氣相色譜(GC)進(jìn)行分離,不同的揮發(fā)性成分在色譜柱中由于其物理化學(xué)性質(zhì)的差異而得到分離。然后進(jìn)入質(zhì)譜(MS)檢測(cè)器,質(zhì)譜儀通過(guò)將分子離子化并根據(jù)其質(zhì)荷比進(jìn)行分析,從而確定揮發(fā)性成分的種類和含量。通過(guò)與已知微生物的揮發(fā)性代謝產(chǎn)物譜圖進(jìn)行比對(duì),可判斷樣品中是否存在特定的微生物。
適用范圍:可用于檢測(cè)肉類中因微生物生長(zhǎng)而產(chǎn)生的特征性揮發(fā)性代謝產(chǎn)物,進(jìn)而推斷微生物的種類和污染情況,對(duì)肉類的新鮮度評(píng)估和微生物污染預(yù)警有一定作用。
全自動(dòng)微生物生化鑒定系統(tǒng):
檢測(cè)原理:基于微生物的生化特性。系統(tǒng)中包含多種不同的生化反應(yīng)培養(yǎng)基或試劑,將待檢的肉類微生物接種到這些培養(yǎng)基或試劑中,微生物在生長(zhǎng)過(guò)程中會(huì)利用培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)行代謝,產(chǎn)生不同的代謝產(chǎn)物,導(dǎo)致培養(yǎng)基的顏色、pH 值等發(fā)生變化。儀器通過(guò)檢測(cè)這些生化反應(yīng)的結(jié)果,并與數(shù)據(jù)庫(kù)中已知微生物的生化特征進(jìn)行比對(duì),從而鑒定出微生物的種類。
適用范圍:主要用于對(duì)肉類中分離培養(yǎng)后的微生物進(jìn)行準(zhǔn)確的種類鑒定,可鑒定常見的細(xì)菌、酵母菌等多種微生物。
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